浙江省人民政府关于修改《浙江省商品条码管理办法》的决定
浙江省人民政府
浙江省人民政府关于修改《浙江省商品条码管理办法》的决定
省政府令第230号
《浙江省人民政府关于修改〈浙江省商品条码管理办法〉的决定》已经省人民政府第91次常务会议审议通过，现予公布，自公布之日起施行。
省长 吕祖善
二○○七年四月二十九日
浙江省人民政府关于修改《浙江省商品条码管理办法》的决定
省人民政府决定对《浙江省商品条码管理办法》作如下修改：
一、第一条修改为：“为加强和规范商品条码管理，保证商品条码质量，推广商品条码使用，促进商品条码的商业信息化应用，根据《中华人民共和国标准化法》等有关规定，结合本省实际，制定本办法。”
二、第二条修改为：“本办法所称商品条码，是指由一组规则排列的条、空及其对应代码组成，表示特定信息的全球统一商品标识，包括零售商品代码、非零售商品代码、物流单元代码等。”
三、第三条修改为：“本省行政区域内商品条码的注册、编码、印制、使用及其管理，适用本办法。”
四、第四条修改为：“县级以上人民政府应当引导和支持商品生产者、销售者和服务提供者使用商品条码，并将推广应用商品条码纳入当地信息化建设内容。”
五、第五条增加一款作为第二款：“县级以上人民政府质量技术监督行政部门应当加强对商品条码应用的宣传、推广工作，建立并实施有效的产品跟踪与追溯系统。”
六、增加一条作为第七条：“鼓励商品生产者、销售者和服务提供者在生产、销售、运输、仓储和物流单元管理时使用商品条码；鼓励商品生产者、销售者在出口有预包装的产品上使用商品条码。”
七、第七条第二款改为第九条，增加一款作为第二款：“物品编码分支机构应当自受理之日起五个工作日内，将申请资料报送中国物品编码中心注册厂商识别代码。”
八、增加一条作为第十五条：“在本省行政区域内生产下列预包装产品，应当申请注册厂商识别代码，并在产品标识中标注商品条码：
（一）食品、卷烟、酒、饮料、保健品；
（二）化妆品、日用化学品、儿童玩具、家用电器；
（三）药品、医疗器械。
生产前款第（一）、（二）项预包装产品的企业，未在其产品标识中标注商品条码的，应当在2008年底前标注商品条码；生产前款第（三）项预包装产品的企业，未在其产品标识中标注商品条码的，应当在2009年底前标注商品条码。”
九、第十七条改为第十九条，修改为：“从事印制商品条码（包括制作商品条码原版胶片，下同）的企业，应当具有健全的商品条码印刷质量保证体系，并按照《印刷业管理条例》的规定取得印刷经营许可后，方可承揽商品条码印制业务。”
十、删去第十八条。
十一、第二十四条第三款改为第二十六条，修改为：“经销企业不得以商品条码的名义向供货方收取进店费、上架费、信息处理费等费用，阻碍商品条码的推广应用。
经销企业需要在本单位内部对再加工、分装或者不规则包装的商品使用店内码的，应当根据国家标准编制。
已经标注合格商品条码的，销售企业应当直接采用商品条码，不得另行编制、使用店内码。”
十二、增加一条作为第二十七条：“质量技术监督、食品药品监督管理、工商等部门应当利用商品条码，加强对产品质量的监督管理，并对本办法第十五条规定的预包装产品，逐步实施产品质量责任跟踪和追溯。
使用、印制商品条码的单位和个人应当接受有关管理部门依法对商品条码的检查和管理。”
十三、增加一条作为第二十九条：“质量技术监督行政部门、物品编码分支机构有下列情形之一的，由其上级行政机关或者行政监察机关按照管理权限，对直接负责的主管人员和其他直接责任人员给予行政或者纪律处分：
（一）未依照本办法规定办理厂商识别代码的注册、变更、续展的；
（二）在办理厂商识别代码注册、变更、续展时，违反国家有关规定收取费用的；
（三）在办理厂商识别代码注册、实施监督检查时，索取或者收受他人财物或者谋取其他利益的；
（四）有其他滥用职权、徇私舞弊行为的。”
十四、第二十七条改为第三十条，修改为：“违反本办法第十一条、第十六条、第十八条、第二十六条规定的，由县级以上人民政府质量技术监督行政部门责令改正；其中违反第十八条、第二十六条第一款规定的，可处三千元以下的罚款。”
十五、第二十八条改为第三十一条，修改为：“违反本办法第十五条规定的，由县级以上人民政府质量技术监督行政部门责令改正，可处一万元以下的罚款。”
十六、增加一条作为第三十二条：“从事印制商品条码的企业违反本办法第二十条规定的，由县级以上人民政府质量技术监督行政部门依照《浙江省产品质量监督条例》第三十七条的有关规定处罚。”
十七、第二十九条改为第三十三条，修改为：“违反本办法第二十一条、第二十三条规定的，由县级以上人民政府质量技术监督行政部门责令改正，可处一万元以下的罚款。”
十八、删去第三十一条、第三十二条、第三十三条。
十九、增加一条作为第三十五条：“预包装产品，是指经预先定量包装或者装入、灌入容器内，向消费者直接提供的产品。”
此外，对有关条文的顺序和文字表述作了适当的调整和修改。
本决定自公布之日起施行。
《浙江省商品条码管理办法》根据本决定作出修正，重新公布。
浙江省商品条码管理办法
第一章总则
第一条为加强和规范商品条码管理，保证商品条码质量，推广商品条码使用，促进商品条码的商业信息化应用，根据《中华人民共和国标准化法》等有关规定，结合本省实际，制定本办法。
第二条本办法所称商品条码，是指由一组规则排列的条、空及其对应代码组成，表示特定信息的全球统一商品标识，包括零售商品代码、非零售商品代码、物流单元代码等。
第三条本省行政区域内商品条码的注册、编码、印制、使用及其管理，适用本办法。
第四条县级以上人民政府应当引导和支持商品生产者、销售者和服务提供者使用商品条码，并将推广应用商品条码纳入当地信息化建设内容。
第五条省质量技术监督行政部门主管全省商品条码工作。市、县质量技术监督行政部门负责本行政区域内商品条码的监督检查工作。
县级以上人民政府质量技术监督行政部门应当加强对商品条码应用的宣传、推广工作，建立并实施有效的产品跟踪与追溯系统。
第六条中国物品编码中心设在本省的分支机构（以下简称物品编码分支机构）按照其规定的职责范围开展工作，提供商品条码的技术服务。
第七条鼓励商品生产者、销售者和服务提供者在生产、销售、运输、仓储和物流单元管理时使用商品条码；鼓励商品生产者、销售者在出口有预包装的产品上使用商品条码。
第二章注册、变更、续展和注销
第八条依法取得营业执照或者相关合法资质证明的生产者、销售者和服务提供者使用商品条码，应当申请注册厂商识别代码，经注册成为中国商品条码系统成员（以下简称系统成员）后，可以使用商品条码。
第九条申请人申请注册厂商识别代码，应当向物品编码分支机构办理有关注册手续，填写厂商识别代码注册申请书，出示营业执照或者相关合法资质证明并提供复印件。
物品编码分支机构应当自受理之日起五个工作日内，将申请资料报送中国物品编码中心注册厂商识别代码。
第十条申请人获准注册厂商识别代码的，由中国物品编码中心发给《中国商品条码系统成员证书》（以下简称《系统成员证书》）。
第十一条系统成员变更名称、地址，应当自有关主管部门批准或者核准之日起三十日内，持变更证明文件和《系统成员证书》到物品编码分支机构办理变更手续。
第十二条厂商识别代码的有效期为二年。
系统成员应当在厂商识别代码期满前三个月内，持《系统成员证书》、营业执照或者相关合法资质证明及其复印件到物品编码分支机构办理续展手续。逾期未办理续展手续的，由物品编码分支机构报请中国物品编码中心核准，注销其厂商识别代码和系统成员资格。
第十三条系统成员停止使用商品条码的，应当自停止使用之日起三个月内，持《系统成员证书》到物品编码分支机构办理注销手续。
依法被撤销、解散、宣告破产或者其他原因终止的系统成员，应当同时停止使用商品条码，并依照前款规定办理注销手续。
第十四条已被注销厂商识别代码的生产者、销售者和服务提供者，需要使用商品条码的，应当重新申请注册厂商识别代码。
第十五条在本省行政区域内生产下列预包装产品，应当申请注册厂商识别代码，并在产品标识中标注商品条码：
（一）食品、卷烟、酒、饮料、保健品；
（二）化妆品、日用化学品、儿童玩具、家用电器；
（三）药品、医疗器械。
生产前款第（一）、（二）项预包装产品的企业，未在其产品标识中标注商品条码的，应当在2008年底前标注商品条码；生产前款第（三）项预包装产品的企业，未在其产品标识中标注商品条码的，应当在2009年底前标注商品条码。
第三章编码、设计和印刷
第十六条系统成员应当按照有关国家标准的规定，编制商品条码，并自编制之日起三十日内到物品编码分支机构办理备案手续。
第十七条商品条码的印刷面积超过商品包装或者标签可印刷面积四分之一的，可以通过物品编码分支机构，向中国物品编码中心申请使用缩短版商品条码。
第十八条商品条码的设计，包括尺寸、颜色及印刷位置应当执行有关国家标准。
第十九条从事印制商品条码（包括制作商品条码原版胶片，下同）的企业，应当具有健全的商品条码印刷质量保证体系，并按照《印刷业管理条例》的规定取得印刷经营许可后，方可承揽商品条码印制业务。
第二十条印制商品条码，应当查验、复印委托人的《系统成员证书》，登记证书号码。委托人不能提供证书的，不得承印。复印、登记资料应当保存二年以上。
从事印制商品条码的企业不得向非委托人提供商品条码。
第二十一条商品条码的印刷及所需原版胶片的制作，应当执行有关商品条码印制的国家标准，不得向委托人提供质量不合格的商品条码。
第四章使用和管理
第二十二条任何单位和个人不得伪造、冒用商品条码或者将其他形式的条码冒充为商品条码。
第二十三条系统成员不得擅自将其注册的厂商识别代码以及相应的商品条码转让、许可他人使用。
第二十四条使用其他国家和地区商品条码的厂商，应当及时向物品编码分支机构备案。
第二十五条经销企业采用与商品条码有关的自动化扫描销售系统，应当符合国家标准的要求。
经销企业对所经销商品使用的商品条码应当进行查验，发现违法使用商品条码的，应当拒绝销售。
第二十六条经销企业不得以商品条码的名义向供货方收取进店费、上架费、信息处理费等费用，阻碍商品条码的推广应用。
经销企业需要在本单位内部对再加工、分装或者不规则包装的商品使用店内码的，应当根据国家标准编制。
已经标注合格商品条码的，销售企业应当直接采用商品条码，不得另行编制、使用店内码。
第二十七条质量技术监督、食品药品监督管理、工商等部门应当利用商品条码，加强对产品质量的监督管理，并对本办法第十五条规定的预包装产品，逐步实施产品质量责任跟踪和追溯。
使用、印制商品条码的单位和个人应当接受有关管理部门依法对商品条码的检查和管理。
第二十八条商品条码的质量监督检验机构应当依法设立，必要时也可以委托物品编码分支机构进行质量监督检验。
第五章法律责任
第二十九条质量技术监督行政部门、物品编码分支机构有下列情形之一的，由其上级行政机关或者行政监察机关按照管理权限，对直接负责的主管人员和其他直接责任人员给予行政或者纪律处分：
（一）未依照本办法规定办理厂商识别代码的注册、变更、续展的；
（二）在办理厂商识别代码注册、变更、续展时，违反国家有关规定收取费用的；
（三）在办理厂商识别代码注册、实施监督检查时，索取或者收受他人财物或者谋取其他利益的；
（四）有其他滥用职权、徇私舞弊行为的。
第三十条违反本办法第十一条、第十六条、第十八条、第二十六条规定的，由县级以上人民政府质量技术监督行政部门责令改正；其中违反第十八条、第二十六条第一款规定的，可处三千元以下的罚款。
第三十一条违反本办法第十五条规定的，由县级以上人民政府质量技术监督行政部门责令改正，可处一万元以下的罚款。
第三十二条从事印制商品条码的企业违反本办法第二十条规定的，由县级以上人民政府质量技术监督行政部门依照《浙江省产品质量监督条例》第三十七条的有关规定处罚。
第三十三条违反本办法第二十一条、第二十三条规定的，由县级以上人民政府质量技术监督行政部门责令改正，可处一万元以下的罚款。
第三十四条违反本办法第二十二条规定的，由县级以上人民政府质量技术监督行政部门责令改正，可处三万元以下的罚款。
第六条附则
第三十五条预包装产品，是指经预先定量包装或者装入、灌入容器内，向消费者直接提供的产品。
第三十六条本办法自2002年1月1日起施行。
关于进境鸵鸟检疫有关问题的通知
动植物检疫局
关于进境鸵鸟检疫有关问题的通知
（动植检动字〔１９９６〕８７号）
各直属口岸动植物检疫局、动物检疫所：
近年来，鸵鸟的引进和繁养在我国呈现了迅猛发展的势头，为满足引进鸵鸟及其种蛋的需要，一年多来，我们先后与美国、加拿大、法国、荷兰、津巴布韦、博茨瓦那、澳大利亚和纳米比亚签署了进境鸵鸟的检疫和卫生条件议定书，从而为引进鸵鸟在检疫方面铺平了道路。随着鸵鸟的大量引进，我们的检疫工作也日趋繁重，而鸵鸟的检疫在我国还是个崭新的课题，为总结近年来进境鸵鸟的检疫经验，进一步提高检疫水平，防止疫病随进口鸵鸟及其种蛋传入我国，使鸵鸟的检疫工作更加规范化和标准化，保证进境鸵鸟检疫工作的顺利进行，现就进境鸵鸟及其种蛋入境后的检疫工作的有关问题通知如下：
一、进境鸵鸟检疫
1．鸵鸟入境后须在口岸动植物检疫局指定的隔离场所进行为期45天的隔离检疫
，如须延长隔离检疫时间，须报国家局批准。
2．鸵鸟运抵隔离场一周后，逐只进行采血采样，并分成两份，其中一份保存备
查，并注意编号。
3．隔离检疫期间的实验室检疫项目，主要依照我国与输出国缔结的鸵鸟检疫议
定书规定的实验室检疫项目进行。如发生特种情况可做特殊检疫项目。
4．实验室检疫的操作试行程序附后。
二、进境鸵鸟种蛋检疫
1．进境种蛋的孵化厂须获得口岸动植物检疫机关的认可。
2．进境鸵鸟种蛋在入孵前，须用有效的消毒药进行熏蒸处理。
3．进境种蛋不得与其他种蛋一同孵化。
4．首次孵出的小鸟须在口岸动植物检疫机关认可的场所由口岸检疫机关隔离检
疫30天，在此期间采样并依照我国与输出国缔结的鸵鸟种蛋的检疫议定书规定的项目作实验室检疫。
三、其他未尽事宜按《进境动物检疫管理办法》执行。
四、在执行过程中有何问题，请及时上报国家局。
附件：鸵鸟疫病实验室检疫操作试行规程
中华人民共和国动植物检疫局
一九九六年八月二十六日
鸵鸟沙门氏菌泄殖腔拭子培养规程（试行）
一、材料：
灭菌棉拭子、缓冲蛋白胨水、亚硒盐胱氨酸增菌液、胆硫乳琼脂、三糖铁琼脂、生化试验管、多价血清因子、细菌培养必需设备。
二、操作方法：用无菌棉拭子从泄殖腔取样，放无菌瓶中，尽可能冷藏于2～4℃，编号后送实验室检验。
三、实验室检验：
┌────────┐
│ 棉拭子样品 │
└─┬──────┘
│
┌─────┴─────┐
│ 缓冲蛋白胨水 │
└───┬───────┘
３７℃ │１８￣２４hr
┌──┴───────┐
│ 亚硒盐胱胺酸增菌液 │
└─┬────────┘
３７℃│ １８￣２４hr
│
┌───┴───┐
│ ＤＨＬ培养基 ├────────────────┐
└─┬─────┘ │
┌──┴───────┐ ┌──┴────┐
│挑取可疑菌落划线接种│ │ 可疑菌落 │
└────┬─────┘ └──┬────┘
│ │
┌───┴────┐ │
│ 三糖铁培养基 │ │
└──┬─────┘ ┌────┴──────┐
│ │ 革兰氏染色，镜检 │
３７℃ │ １８￣２４hr │ │
│ └────────┬──┘
┌─┴──┐ │
┌─┤细菌鉴定├───┐ │
│ └────┘ │ │
│ │ │
┌┴───┐ ┌─┴──────┐ │
│生化试验│ │ 血清学试验 │ │
└─┬──┘ └┬───────┘ │
│ ┌┴─────┐ │
└───────┤综合判定结果├─────────────┘
└─┬────┘
┌─┴────────┐
│ 试验结果报告 │
└──────────┘
鸵鸟鹦鹉热间接血凝（IHA）操作规程（试行）
一、本规程适用于鸵鸟衣原体病的诊断。
二、材料
衣原体属抗原致敏绵羊红细胞
标准阴、阳性对照血清
被检血清：采集鸵鸟血清，试验前于56℃水浴灭活30分钟。
90度V型反应板
灭菌生理盐水
微量加样器
三、试验方法
1．将生理盐水滴于V型反应板中，每孔50ul。
2．取被检血清50ul于第一孔中，与生理盐水混匀后吸50ul于第二孔，依次作倍
比稀释至1∶16。
3．将1∶8和1∶16两孔各加25ul抗原，如作定量试验可根据实际需要自行决定。
4．对照试验：设阳性血清＋抗原、阴性血清＋抗原、生理盐水＋抗原各一孔。
四、血凝反应程度的标准：
“＋＋＋＋”：红细胞全部凝集，形成一层均匀的膜，布满整个孔底。
“＋＋＋”：红细胞在孔底形成一层薄膜，面积比前者稍小。
“＋＋”：红细胞在孔底形成薄层凝集，边缘松散或呈锯齿状。
“＋”：红细胞在孔底呈稀薄、散在、少量凝集，孔底有小圆点。
“＋”：红细胞沉于孔底，但周围不光滑或中心有空斑。
“—”：红细胞完全沉于孔底，呈光滑的圆点。
“＋＋”以上的凝集判为阳性凝集。
五、结果判定
1．对照试验：出现如下结果试验方可成立，否则应重试，阳性血清＋抗原呈“
＋＋＋＋”；阴性血清十抗原呈“-”；抗原十生理盐水
2．被检样品判定标准：血清效价＞1∶8（＋＋）判为阳性。
鸵鸟新城疫、禽流感、付粘病毒分离操作规程（试行）
本规程适用于新城疫、禽流感、付粘病毒的分离
一、材料
1．消毒棉拭子
2．灭菌试管
3．灭菌生理盐水
4．泄殖腔棉拭子保存液：PBS，PH7．2-7.4，青霉素1万单位／ml，链霉素10mg/m1，庆大霉素250ug/ml，制霉素5000u／ml。
5．SPF种蛋。
6．90度V型反应板。
7．微量加样器。
二、操作方法
1．将采集的泄殖腔棉拭子置于样品保存液中，置4℃过夜。次日3000rpm离心10min，上清液作菌检后接种9～10日龄鸡胚（每胚0．2ml），37℃再孵育5天，去掉24小时死亡的鸡胚，其他鸡胚放4℃冷却后，检测鸡胚尿囊液的血凝滴度。如尿囊液
的血凝反应呈阴性，应再用鸡胚盲传2代。
2．将收集的尿囊液用PBS以25ul量进行倍比稀释，加25ul的1％鸡红细胞，轻轻
混匀，静置15～30min，判定血凝滴度。
如鸡胚尿囊液的血凝试验呈阳性，应分别用新城疫病毒、禽流感病毒、副粘病毒的阳性血清作血凝抑制试验以检测病毒的种类。
表一 鸡胚尿囊液血凝试验 （单位：ul）
┌─────┬────┬────┬────┬────┬────┬────┬────┬────┬────┬────┬───┬────┐
│ 孔号 │ 1 │ 2 │ 3 │ 4 │ 5 │ 6 │ 7 │ 8 │ 9 │ 10 │ 11│ 12 │
├─────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼───┼────┤
│抗原稀释度│ 1∶2 │ 1∶4 │ 1∶8 │1∶16 │1∶32 │ 1∶64 │ 1∶128│ 1∶256│ 1∶512│1∶1024 │对照 │对照 │
├─────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼───┼────┤
│ 生理盐水│ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 50│ 50 │
├─────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼───┼────┤
│ 抗原 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ │ │
├─────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼───┼────┤
│1％红细胞 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25│ 25 │
└─────┴────┴────┴────┴────┴────┴────┴────┴────┴────┴────┴───┴────┘
室温15min，每5mim观察一次
┌─────┬────┬────┬────┬────┬────┬────┬────┬────┬────┬────┬───┬────┐
│ 判定举例│++++ │++++ │++++ │+++ │ ++ │ - │ - │ - │ - │ - │ - │ - │
└─────┴────┴────┴────┴────┴────┴────┴────┴────┴────┴────┴───┴────┘
禽流感血凝抑制试验操作程序（试行）
一、试验材料
1．抗原：禽流感病素H5、H7型抗原；
2．阴、阳性对照血清。
3．红细胞：无菌采集鸡血液5～10ml于少许阿氏液中摇匀，以洗涤3～5次，每次3000rpm离心10min，将血浆、白细胞充分洗去至上清液清亮，再将沉淀的红细胞稀释成1％的红细胞悬浮液（RBC）；
4．被检血清：采集被检鸵鸟血液，离心分离血清，56℃灭活30min；
5．稀释液：灭菌的生理盐水或PBS（pH7．2～7．4）
6．90度V型反应板，微量加样器。
二、试验操作
1．血凝试验（HA）：
取干净的微量滴定板（V型）一块，按表一进行操作：每孔加25ul生理盐水，孔
1加禽流感抗原25ul，用移液器反复吹打混匀三次；吸出25ul于孔2，吹打混匀后吸出25ul于孔3；如此依次稀释到孔10，孔10混匀后吸出25ul弃掉。孔11、12不加抗原
，只加生理盐水作空白对照。加入1％的红细胞悬浮液25ul，充分振荡后置于室温；
每5min观察一次，15～30min后判定结果，并作好记录。
表一 禽流感血凝试验 （单位：ul）
┌─────┬───┬───┬───┬───┬───┬───┬────┬────┬────┬────┬───┬───┐
│ 孔号 │ 1 │ 2 │ 3 │ 4 │ 5 │ 6 │ 7 │ 8 │ 9 │ 10 │ 11│ 12│
├─────┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼────┼────┼────┼────┼───┼───┤
│抗原稀释度│ 1∶2│ 1∶4│ 1∶8│1∶16 │1∶32 │1∶64 │ 1∶128│ 1∶256│ 1∶512│1∶1024 │对照 │对照 │
├─────┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼────┼────┼────┼────┼───┼───┤
│生理盐水 │ 25│ 25│ 25│ 25│ 25│ 25│ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 50│ 50│
├─────┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼────┼────┼────┼────┼───┼───┤
│ 抗原 │ 25│ 25│ 25│ 25│ 25│ 25│ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ │ │
├─────┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼────┼────┼────┼────┼───┼───┤
│1％红细胞 │ 25│ 25│ 25│ 25│ 25│ 25│ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25│ 25│
└─────┴───┴───┴───┴───┴───┴───┴────┴────┴────┴────┴───┴───┘
室温15min，每5min观察一次
┌─────┬───┬───┬───┬───┬───┬───┬────┬────┬────┬────┬───┬───┐
│ 判定举例│ + │ + │ + │ + │ + │ + │ + │ - │ - │ - │ - │ - │
└─────┴───┴───┴───┴───┴───┴───┴────┴────┴────┴────┴───┴───┘
抗原的血凝滴度是凡能使1％的鸡红细胞完全凝集的病毒最高稀释倍数；因此，
能使红细胞完全凝集的最高稀释倍数的病毒液25ul称为1个血凝单位（HA）。如该抗
原的血凝单位为1∶128／25ul。
在进行禽流感血凝抑制试验时，病毒的工作浓度应为8HA。因为该试验的抗原的
血凝单位为1∶128／25ul，按其孔号数（孔．7）倒退3孔的稀释倍数（孔4 1∶16）
，作为该病毒的工作浓度：1∶16／25ul。
2．血凝抑制试验（HI）：
取干净的微量滴定板（V型）一块，按表二进行操作：每孔加25ul生理盐水，孔
1加待检血清25ul，用移液器反复吹打混匀三次；吸出25ul于孔2，吹打混匀后吸出25ul于孔3；如此依次稀释到孔8，孔8混匀后吸出25ul弃掉。孔9作为阳性血清对照，孔10作为阴性血清对照，孔11不加任何血清而作为抗原对照，孔12不加抗原和任何血清，只加PBS作空白对照。各孔加入1％的红细胞悬浮液25ul，充分振荡后置于室温；每5min观察一次，15～30min后判定结果，并作好记录。
未免疫的健康鸵鸟血清无血凝抑制作用，各稀释倍数均出现红细胞凝集现象；禽流感感染或免疫的鸵鸟血清能抑制禽流感病毒对红细胞的凝集作用。凡能使8HA的
抗原凝集红细胞作用完全抑制的血清最高稀释倍数，称为该血清的血凝抑制价（如表二的血凝抑制价为1∶64）。
表二 禽流感血凝抑制试验 （单位：ul）
┌──────┬───┬───┬───┬────┬────┬───┬────┬────┬────┬────┬───┬───┐
│ 孔号 │ 1 │ 2 │ 3 │ 4 │ 5 │ 6 │ 7 │ 8 │ 9 │ 10 │ 11│ 12│
├──────┼───┼───┼───┼────┼────┼───┼────┼────┼────┼────┼───┼───┤
│血清稀释度 │ 1∶2│ 1∶4│ 1∶8│ 1∶16 │ 1∶32 │1∶64 │ 1∶128│ 1∶256│ 阳性 │ 阴性 │抗原 │对照 │
├──────┼───┼───┼───┼────┼────┼───┼────┼────┼────┼────┼───┼───┤
│ 生理盐水 │ 25│ 25│ 25│ 25 │ 25 │ 25│ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 50│ 75│
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│ 被检血清 │ 25│ 25│ 25│ 25 │ 25 │ 25│ 25 │ 25 │ (25)│ (25)│ │ │
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│ 8HA抗原 │ 25│ 25│ 25│ 25 │ 25 │ 25│ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25│ │
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室温感作5～6min
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│ 1％红细胞 │ 25│ 25│ 25│ 25 │ 25 │ 25│ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 25│ 25│
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室温15min，每5min观察一次
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│ 判定举例 │ - │ - │ - │ - │ - │ + │ + │ + │ + │ + │ + │ + │
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3．判定标准
1）判定时应首先观察各对照孔是否完全符合；
2）红细胞凝集：红细胞分散在孔底四周呈均匀的颗粒状凝集且布满整个孔底，
判为血凝作用为阳性“十”；
3）无凝集或凝集抑制：红细胞集中于孔底中央呈点状，判血凝作用为阴性“—
”，或判血凝抑制作用为阳性；
4）血凝抑制价：凡能使抗原的血凝作用完全受到抑制的最高血清稀释倍数；
5）被检血清的血凝抑制价在1∶8以上者，判为阳性反应；
6）最后判定时间与感作时间有关。温度高时感作时间短，15min即可；温度低时可适当延长，但最长不得超过30min。
禽流感琼脂扩散试验操作规程（试行）
1．琼脂凝胶平板的制备：称取琼脂糖1g，氯化钠8．5g，加入100ml蒸馏水，10磅10分钟高压溶解后，冷却至45℃，加入0．01％叠氮钠，每个直径6CM平皿加7ml融化琼脂，厚度为2．8mm，待凝固后置冰箱内片刻。
2．打孔：中间一孔，周围六孔为一组，孔径3mm，孔居2．5mm。
3．加样：中心孔加抗原，周围1、3、5孔加阳性血清，2、4、6孔加被检血清。
4．加样后置湿盒内，于室温下感作。
5．结果判定：24小时初判，48小时终判，阳性对照成立时，进行判定。
阳性：被检血清孔与抗原孔之间出现致密沉淀线，并与标准阳性血清的沉淀线末端互相联接。
可疑：标准阳性血清孔和抗原孔之间的沉淀线向被检血清孔内侧弯曲。
阴性：抗原孔与被检血清孔之间不出现沉淀线或标准阳性血清与阳性孔间的沉淀线向毗邻的被检血清孔直伸或其外侧偏弯。
禽副粘病毒血凝抑制试验操作程序
一、试验材料
1．抗原：禽副粘病毒病毒Ⅱ型抗原；
2．红细胞：无菌采集鸡血液5～10ml于少许阿氏液中摇匀，以洗涤3～5次，每次3000离心10min，将血浆、白细胞充分洗去至上清液清亮，再将沉淀的红细胞稀释
成1％的红细胞悬浮液（RBC）；
3．被检血清：采集被检鸵鸟血液，离心分离血清，56℃灭活30min；
4．稀释液：灭菌的生理盐水或PBS（pH7．2～7．4）
5．阴、阳性对照血清
6．90度V型反应板，微量加样器。
二、试验操作
1．血凝试验（HA）：
取干净的微量滴定板（V型）一块，按表一进行操作：每孔加25ul生理盐水，孔
1加禽流感抗原25ul，用移液器反复吹打混匀三次；吸出25ul于孔2，吹打混匀后吸出25ul于孔3；如此依次稀释到孔10，孔10混匀后吸出25ul弃掉。孔11、12不加抗原
，只加生理盐水作空白对照。加入1％的红细胞悬浮液25ul，充分振荡后置于室温；
每5min观察一次，15～30min后判定结果，并作好记录。
表一 禽副粘病毒血凝试验 （单位：ul）
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│ 孔号 │ 1 │ 2 │ 3 │ 4 │ 5 │ 6 │ 7 │ 8 │ 9 │ 10 │ 11│ 12│
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│抗原稀释度 │ 1∶2│ 1∶4│ 1∶8│1∶16 │1∶32 │1∶64 │ 1∶128│ 1∶256│ 1∶512│ 1∶1024 │对照 │对照 │
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│ 生理盐水 │ 25│ 25│ 25│ 25│ 25│ 25│ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ 50│ 50│
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│ 抗原 │ 25│ 25│ 25│ 25│ 25│ 25│ 25 │ 25 │ 25 │ 25 │ │ │
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